本文采用正丁烷浸提法提取苦瓜籽仁得苦瓜籽油,经气相色谱分析脂肪酸组成,同时对比新鲜的和放置两个半月的苦瓜籽油中脂肪酸组成的变化,为苦瓜籽油的开发提供基础数据,同时为苦瓜籽的综合利用提供依据。
1材料与方法
1.1材料、仪器
苦瓜籽(北京某公司),脱壳处理。脂肪酸甲酯标准品:CLA(9clIt—CLA,8tlOc—CLA,1lcl3t—CLA,10tl2c—CLA),美国Nu—Chek—Prep公司。乙醚、乙醇、正丁烷、CHOH、硫酸、硫酸铵、三氟化硼、硫酸铜、无水NaSO、HC1、NaOH、韦氏试剂、硫代硫酸钠、KI、淀粉、酚酞、甲基红、溴甲酚绿、蔗糖、NaC1均为分析纯;异辛烷为色谱纯。6980N型气相色谱仪(Agilent公司),索氏抽提器,旋转蒸发器,TGL一16C高速离心机,101A一1型电热鼓风干燥箱,微量凯氏定氮仪,BS210s电子分析天平,破碎机,水浴锅,干燥器,60目筛。
1.2试验方法
1.2.1苦瓜籽理化指标测定
水分及挥发物按照GB/T14489.1—2008测定,含油量按照GB/T14488.1-_2008测定,粗蛋白按照GB/T14489.2-2008测定。
1.2.2苦瓜籽油提取
将脱壳的苦瓜籽粉碎,过60目筛后,经正丁烷(从提高溶剂的回收率和油脂的提取率角度考虑,本试验采用正丁烷作为浸提溶剂)溶剂浸提后,减压蒸发回收溶剂,得苦瓜籽油。
1.2.3苦瓜籽油理化指标测定
酸值按GB/T5530-2005测定,碘值按GB/T5532-2008测定,皂化值按GB/T5534-2008测定,不皂化物按GB/T5535-2008测定。
1.2.4苦瓜籽油脂肪酸组成分析
1.2.4.1脂肪酸甲酯化
称取0.2g提取的苦瓜籽油,加入0.5mol/,L的NaOH—cHOH溶液4mL,置于50mL的烧瓶中,于60℃水浴回流30rain,用移液管从冷凝器顶部加人5mL12%的三氟化硼一甲醇溶液,继续煮沸30rain。再用同样方法加入3mL异辛烷,冷却后加入20mL饱和NaC1溶液,振荡后继续加饱和NaC1溶液至烧瓶颈部,静置分层。最后取2mL上层溶液加适量无水Na:S0干燥后备用。
1.2.4.2气相色谱分析
分别对新鲜的和放置两个半月的苦瓜籽油进行气相色谱测定,分析其脂肪酸组成和含量的变化。气相色谱条件:色谱柱为cP—Si188熔融石英毛细管柱(100m×0.25mm,ChrompackBridgewa—ter,NJ),N为载气,H:、空气为燃烧气。FID温度250℃,进样口温度250℃。程序升温过程:45℃保持3min后以13~C/min的升温速率将温度升至175,保持27rain后以4~C/rain的升温速率将温度升至215oC,保持5rain。测定时间为86rain。
2结果与分析
2.1苦瓜籽理化指标(见表1)
表1苦瓜籽理化指标%
从表1结果可知,苦瓜籽含油量为42.2%,粗蛋白含量为36.4%。含油量和粗蛋白含量都较高。
2.2苦瓜籽油理化指标
苦瓜籽经正丁烷提取,减压浓缩得苦瓜籽油,新鲜的苦瓜籽油呈浅黄色液体,冷却至室温即呈奶白色固态,具有辣喉味。放置两个半月后白色固体色泽变黄。这可能是苦瓜籽油的脂肪酸组成发生改变所导致的。新鲜苦瓜籽油主要理化指标见表2。
表2苦瓜籽油理化指标
从表2可看出,苦瓜籽油的碘值(I)在100—130g/100g之间,属半干性油;苦瓜籽油的皂化值(KOH)小于200mg/g,根据皂化值和相对分子质量的关系j,推测其所含脂肪酸以十八碳脂肪酸为主。
2.3苦瓜籽油脂肪酸组成
为了确定新鲜的和放置两个半月的苦瓜籽油脂肪酸组成和含量是否改变,分别对新鲜的和放置两个半月的苦瓜籽油进行气相色谱分析,气相色谱图见图1、图2,其脂肪酸组成分析结果见表3。
从表3可知,苦瓜籽油含有26种脂肪酸,以多不饱和脂肪酸为主要成分,这与吴丹等报道的苦瓜籽油中含有25种脂肪酸和以单不饱和脂肪酸为主要成分有出入,同时与刘旭庆等_5报道的各脂肪酸含量也有差异,这可能与苦瓜籽原料的采摘期和油脂提取方法有关。同时,从表3中可知,新鲜的苦瓜籽油经放置两个半月后两种异构体9clltl3t一共轭十八碳三烯酸(一桐酸)和9tlltl3c一共轭十八碳三烯酸(Ol一桐酸异构体)的含量变化很大,分别为新鲜的54。26%对应放置两个半月的35.63%和新鲜的2.42%对应放置两个半月的19.09%。分析原因可能是经放置后Ot一桐酸在空气、日光等作用下不稳定,构型发生变化,从而引起含量上的变化。研究发现9cl1tl3t一共轭十八碳三烯酸是一种主要的共轭亚麻酸(CLN),CLN在体外具有强烈的抗癌活性和降血脂功效。因此,苦瓜籽油具有的抗氧化、抗癌、降血脂作用可能与所含的9clltl3t一共轭十八碳三烯酸有关。
3结论
(1)苦瓜籽仁中含油量为42.2%,属于高含油油料。
(2)经气相色谱分析,苦瓜籽油中共轭十八碳三烯酸的两种异构体含量在新鲜的和放置两个半月的变化很大,分析原因可能是旺一桐酸在空气中不稳定,经放置和日光等作用下转变为一桐酸异构体。
(3)苦瓜籽油所含的a一桐酸是一种主要的共轭亚麻酸(CLN),其具有抗氧化、抗癌、降血脂作用,这为苦瓜籽油在医药和保健食品中的应用提供了理论基础。